在參加125cc組別賽事的同時,1960年Honda開始在250cc組別投入RC161賽車。第二年,Honda憑借RC162賽車奪得了10個大獎賽分站的勝利,加冕制造商總冠軍,其中包括高橋國光的首勝。1962年RC162贏得了9場比賽,1963年RC164贏得4勝,讓Honda連續(xù)三年衛(wèi)冕冠軍。1964與1965年,Honda遭遇低谷,連續(xù)2年與系列冠軍失之交臂。1966年,Honda決心贏得全部5個組別的總冠軍,并成功地實現(xiàn)了這一目標。參與250cc組別賽事的6氣缸RC166賽車是全場矚目的焦點,Mike Hailwood駕駛戰(zhàn)車從賽季第一站(西班牙大獎賽)到第八站(芬蘭大獎賽)的連續(xù)斬獲8勝。自第10站起(曼島TT)Honda推出了更加強勁的RC166賽車,一部轉(zhuǎn)速高的4沖程賽車以抵御2沖程的浪潮。RC166賽車實現(xiàn)了超過60馬力/18000rpm、2.36千克米/17000rpm的動力輸出。除了比上一賽季更加精進的賽車,Honda還選擇由1961年的曼島TT冠軍、給Honda帶來曼島TT首勝的Mike Hailwood出戰(zhàn),并贏得了所參加的全部10站比賽,為Honda贏得車手總冠軍與制造商總冠軍。1967年,Honda減小參賽規(guī)模, Hailwood駕駛小幅改動RC166賽車繼續(xù)參賽。1967年賽季與之前完全不同,Honda在與對手的膠著戰(zhàn)斗中爭奪冠軍。賽季末Hailwood贏得了5勝,加上Ralph Bryans的2勝,Honda以總共7勝的戰(zhàn)績連續(xù)衛(wèi)冕。